Laboratorijski uzgajane ljudske stanične kulture često se koriste u biomedicinskim istraživanjima i razvoju novih tretmana. Među mnogim staničnim linijama, jedna od najpoznatijih je HeLa. Te ćelije, oponašajući ljudsko tijelo in vitro ("in vitro"), su "vječne" - mogu se beskrajno podijeliti, rezultati istraživanja pomoću njih pouzdano se reproduciraju u različitim laboratorijima. Na svojoj površini nose prilično univerzalni skup receptora, što im omogućava da se koriste za proučavanje djelovanja različitih tvari, od jednostavnih anorganskih do proteina i nukleinskih kiselina; oni su nepretenciozni u uzgoju i dobro podnose zamrzavanje i očuvanje.
Te su se stanice neočekivano ušle u veliku znanost. Preuzeti su od žene po imenu HEnrietta LAcks, koja je ubrzo nakon toga umrla. Ali stanična kultura tumora koji ju je ubio pokazala se neophodnim alatom za znanstvenike.
Doznajmo više o ovome …
Henrietta nema
Henrietta Lacks bila je lijepa crna crna Amerikanka. Živjela je u malom gradu Turner u Južnoj Virginiji sa suprugom i petero djece. 1. veljače 1951. Henrietta je otišla u bolnicu Johns Hopkins - brinula ju je neobična iscjedak koji se povremeno nalazio na njenom donjem rublju. Medicinska dijagnoza bila je strašna i nemilosrdna - rak grlića maternice. Osam mjeseci kasnije, unatoč operaciji i terapiji zračenjem, umrla je. Imala je 31 godinu.
Dok je Henrietta bila u bolnici Hopkins, dežurni liječnik poslao je tumorske stanice dobivene uz pomoć biopsije na analizu Georgeu Gayu, šefu laboratorija za istraživanje tkivnih stanica u bolnici Hopkins. U to je vrijeme kultivacija stanica izvan tijela bila tek u fazi formiranja, a glavni problem bila je neizbježna stanična smrt - nakon određenog broja odjeljenja cijela stanična linija umrla je.
Promotivni video:
Pokazalo se da su stanice označene "HeLa" (akronim za ime i prezime Henrietta Lax) množile se mnogo brže od stanica iz normalnog tkiva. Uz to, zloćudna transformacija učinila je ove stanice besmrtnima - njihov program suzbijanja rasta isključen je nakon određenog broja podjela. To se nikada prije nije in vitro dogodilo s bilo kojom drugom stanicom. To je otvorilo neviđene perspektive u biologiji.
Doista, nikada prije toga trenutak nisu mogli istraživači smatrati rezultate dobivene u staničnim kulturama potpuno pouzdanim: svi su pokusi provedeni na različitim staničnim linijama, koje su na kraju uginule - ponekad čak i prije nego što su mogle dobiti bilo kakve rezultate. A onda su znanstvenici postali vlasnici prve stabilne, pa čak i vječne (!) Stanične linije koja na odgovarajući način oponaša svojstva organizma. A kada je otkriveno da HeLa stanice mogu preživjeti čak i slanje pošte, Gay ih je poslao kolegama širom zemlje. Ubrzo je potražnja za HeLa stanicama porasla pa su se presnimavale u laboratorijima širom svijeta. Postali su prva stanična linija "predloška".
Tako se dogodilo da je Henrietta umrla onog dana kad je George Gay govorio pred televizijskim kamerama, držeći epruvetu sa svojim ćelijama. Izjavio je da je započela era novih perspektiva u otkrivanju lijekova i biomedicinskim istraživanjima.
Zašto su joj stanice toliko važne?
I bio je u pravu. Stanična linija, identična u svim laboratorijima svijeta, omogućila je brzo dobivanje i neovisno potvrđivanje sve više i više novih podataka. Možemo sa sigurnošću reći da je golemi skok u molekularnoj biologiji krajem prošlog stoljeća nastao zbog sposobnosti kultiviranja stanica in vitro. Stanice Henrietta Lacks bile su prve besmrtne ljudske stanice ikad uzgajane u medijuma umjetne kulture. HeLa je obučio istraživače za kultiviranje stotina drugih linija ćelija raka. I premda se posljednjih godina prioritet na ovom području preusmjerio na kulture stanica normalnih tkiva i inducirane pluripotentne matične stanice (japanska znanstvenica Shinya Yamanaka dobila je Nobelovu nagradu za fiziologiju ili medicinu 2012. za otkriće metode za vraćanje stanica odraslog organizma u embrionalno stanje),ipak, stanice raka ostaju prihvaćeni standard u biomedicinskim istraživanjima. Glavna prednost HeLa je nekontroliran rast na jednostavnim hranjivim medijima, koji omogućava velika istraživanja uz minimalne troškove.
Od smrti Henriette Lacks njezine se tumorske stanice kontinuirano koriste za proučavanje molekularnih obrazaca razvoja različitih bolesti, uključujući rak i AIDS, za proučavanje učinaka zračenja i otrovnih tvari, za izradu genetskih mapa i ogromnog broja drugih znanstvenih problema. U biomedicinskom svijetu ćelije HeLa postale su poznate koliko i laboratorijski štakori i petrijeve posude. U prosincu 1960. HeLa ćelije prve su letjele u svemir u sovjetskom satelitu. I danas je opsežan eksperiment koji su tada izveli sovjetski genetičari u svemiru. Rezultati su pokazali da HeLa djeluje dobro ne samo u zemaljskim uvjetima, već iu nultoj gravitaciji.
Bez HeLa stanica, razvoj cjepiva protiv poliomije, koji je razvio Jonas Salk, bio bi nemoguć. Usput, Salk je bio toliko uvjeren u sigurnost cjepiva (oslabljeni polio virus) da je sebi, svojoj ženi i troje djece injektirao cjepivo kako bi dokazao pouzdanost svog lijeka.
Od tada se HeLa koristi za kloniranje (prethodni eksperimenti na transplantaciji staničnih jezgara prije kloniranja poznate ovčice Dolly provedeni su na HeLa), za testiranje metoda umjetne oplodnje i tisuće drugih studija (neka od njih prikazana su u tablici).
Osim znanosti …
Osobnost same Henriette Lacks dugo se nije reklamirala. Za dr. Gay, naravno, podrijetlo HeLa stanica nije tajna, ali vjerovao je da je privatnost prioritet, a dugi niz godina obitelj Lacks nije znala da su Henriettane stanice poznate širom svijeta. Misterija je otkrivena tek nakon smrti doktora Gaya 1970. godine.
Podsjetimo da su standardi sterilnosti i tehnike rada s staničnim linijama u to vrijeme bili u povojima, a neke su se pogreške pojavile tek nekoliko godina kasnije. Tako su u slučaju HeLa stanica - nakon 25 godina, znanstvenici otkrili da su mnoge stanične kulture korištene u istraživanjima, a potječu iz drugih vrsta tkiva, uključujući stanice raka dojke i prostate, zaražene agresivnijim i upornijim HeLa stanicama. Pokazalo se da se HeLa može kretati s česticama prašine u zraku ili na nedovoljno opranim rukama i ukorijeniti se u kulturama drugih stanica. To je izazvalo veliki skandal. U nadi da ćemo problem riješiti genotipizacijom (sekvenciranje je cjelovito čitanje genoma - u to se vrijeme to još samo planiralo kao grandiozni međunarodni projekt),jedna je skupina znanstvenika pronašla Henriettine rođake i zatražila DNK uzorke od obitelji kako bi preslikala gene. Tako je otkrivena tajna.
Usput, Amerikance je još više zabrinuta činjenica da Henrietta obitelj nikad nije dobila naknadu za korištenje HeLa ćelija bez pristanka donatora. Obitelj do danas živi u ne baš dobrom blagostanju, a financijska pomoć bila bi vrlo korisna. No, svi upiti padaju u prazan zid - odavno nije bilo ispitanika, a Medicinska akademija i druge znanstvene strukture predvidivo ne žele raspravljati o ovoj temi.
11. ožujka 2013., nova publikacija dodala je gorivo vatri, gdje su predstavljeni rezultati cjelovitog slijeda genoma stanične linije HeLa. Ponovo je eksperiment proveden bez pristanka Henriettanih potomaka, a nakon kratke etičke polemike, puni pristup genomskim informacijama bio je dopušten samo profesionalcima. Unatoč tome, kompletni genski niz HeLa od velike je važnosti za daljnji rad, omogućava upotrebu stanične linije u budućim genomskim projektima.
Prava besmrtnost?
Maligni tumor koji je ubio Henriettu učinio je njene stanice potencijalno besmrtnima. Je li ta žena željela besmrtnost? I je li ga dobila? Ako malo razmislite, nastaje fantastična senzacija - dio žive osobe, umjetno umnožen, podnosi milione testova, „okusi“sve droge prije nego što se testiraju na životinjama, molekularni biolozi širom svijeta uzrujavaju do srži…
Naravno, sve to nema nikakve veze s "životom nakon života". Besmisleno je vjerovati da u ćelijama HeLa, koje neprestano muče nezadovoljni znanstvenici, postoji barem neki dio duše nesretne mlade žene. Štoviše, ove se stanice mogu dijelom smatrati ljudskim. U jezgri svake HeLa stanice postoji 76 do 82 kromosoma zbog transformacije koja se dogodila tijekom malignosti (normalne ljudske stanice sadrže 46 kromosoma), a ova poliploidija periodično pokreće rasprave o prikladnosti HeLa stanica kao modela ljudske fiziologije. Čak je predloženo izoliranje ovih stanica u zasebnu, blisku ljudskoj vrsti, nazvanu Helacyton gartleri, u čast Stanleyja Gartlera, koji je proučavao ove stanice, ali o ovome se danas ozbiljno ne govori.
Međutim, istraživači uvijek imaju na umu ograničenja koja treba imati na umu. Prvo, HeLa, unatoč svim promjenama, i dalje ostaje ljudskim stanicama: svi njihovi geni i biološke molekule odgovaraju ljudskim, a molekularne interakcije u ogromnoj većini slučajeva su identične biokemijskim putevima zdravih stanica. Drugo, poliploidija ovu liniju čini pogodnijom za genomske studije, jer se povećava količina genetskog materijala u jednoj stanici, a rezultati su jasniji i kontrastniji. Treće, široka distribucija staničnih linija širom svijeta omogućava vam da lako ponovite eksperimente kolega i koristite objavljene podatke kao osnovu za svoje vlastito istraživanje. Utvrdivši osnovne činjenice o HeLa modelu (i svi se sjećaju da je ovo čak i zgodan, ali samo model tijela),znanstvenici ih pokušavaju replicirati na adekvatnijim modelnim sustavima. Kao što vidite, HeLa i slične stanice predstavljaju temelj cijele današnje znanosti. I usprkos etičkim i moralnim sporovima, danas želim počastiti sjećanjem na tu ženu, budući da je njezin nehotični doprinos medicini neprocjenjiv: stanice ostavljene nakon nje spasile su i nastavljaju spašavati više života nego što to može učiniti bilo koji liječnik.
Držači zapisa
Besmrtnost HeLa stanica povezana je s posljedicama infekcije humanim papiloma virusom HPV18. Infekcija je uzrokovala triplodiju mnogih kromosoma (stvaranje tri kopije umjesto uobičajenog para) i cijepanje nekih od njih na fragmente. Pored toga, kao posljedica infekcije, povećala se aktivnost mnogih regulatora rasta ćelije, kao što su geni telomeraza (regulator stanične smrti) i c-Myc (regulator aktivnosti sinteze mnogih proteina). Takve jedinstvene (i slučajne) promjene učinile su HeLa stanice rekordnom brzinom i otpornošću čak i među ostalim staničnim linijama raka, kojih danas ima nekoliko stotina. Osim toga, pokazalo se da su dobivene promjene u genomu vrlo stabilne te u laboratorijskim uvjetima ostaju nepromijenjene tijekom posljednjih godina.
Ubrzo nakon Henriettove smrti počela se stvarati tvornica HeLa, veliko poduzeće koje će omogućiti uzgoj trilijuna HeLa ćelija tjedno. Tvornica je sagrađena iz jednog jedinog razloga - da zaustavi polio.
Krajem 1951. najveća svjetska epidemija polio u povijesti. Škole su bile zatvorene, roditelji su bili u panici. Hitno je potrebno cjepivo. U veljači 1952., Jonas Salk sa Sveučilišta u Pittsburghu objavio je da je razvio prvo svjetsko cjepivo protiv poliomije, ali da ga nije mogao ponuditi djeci dok nije temeljito testirao njegovu sigurnost i učinkovitost. To je zahtijevalo kultivirane stanice u tako velikim industrijskim količinama da ih nikada prije nisu proizvodile.
Nacionalna udruga za paralizu dojenčadi (NFIP), dobrotvorna organizacija koju je osnovao predsjednik Franklin Delano Roosevelt, a koju je sam paralizirao polio, pripremala je najveće terensko ispitivanje cjepiva protiv dječje paralize u povijesti bolesti. Planirano je da Salk cijepi dva milijuna djece, a NFIP će im uzeti krv kako bi se testiralo da li su imuni. Međutim, morat će se provesti milijuni testova neutralizacije kada se serum cijepljene djece pomiješa sa živim polio virusima i uzgojenim stanicama. Ako cjepivo djeluje, tada bi serum cijepljene djece trebao blokirati virus polio i zaštititi stanice. Inače, virus inficira stanice i uzrokuje štetu koju znanstvenici mogu vidjeti pod mikroskopom.
Poteškoća je bila u tome što su se majmunske stanice koristile za testove neutralizacije, koji su umrli tijekom ove reakcije. To je bio problem - ne zato što su se brinuli za životinje (o tome se tada nije razgovaralo, za razliku od našeg vremena), već zbog toga što su majmuni bili skupi. Milijuni reakcija neutralizacije s majmunskim stanicama koštali bi milijune dolara, pa je NFIP žestoko tražio da se kultivira, koja bi se mogla množiti i masivno koštati manje od majmunskih stanica.
NFIP se za pomoć obratio Guyu i nekolicini drugih stručnjaka za staničnu kulturu, a Guy je shvatio da je to uistinu zlatni rudnik. Kao rezultat dobrotvorne organizacije, NFIP je u prosjeku primao 50 milijuna dolara donacija, a njegov je direktor želio donirati većinu tog iznosa kultivatorima kako bi mogli pronaći način masovne proizvodnje stanica o kojoj svi sanjaju dugi niz godina.
Ponuda je stigla u pravo vrijeme: sretnom slučajnošću, nedugo nakon poziva iz NFIP-a koji je tražio pomoć, Guy je shvatio da Henrietta-ove stanice ne rastu poput bilo koje ljudske stanice s kojom se do sada susretao.
Većina stanica u kulturi raste u jednom sloju u obliku ugruška na površini čaše, što znači da slobodnog prostora brzo istječe. Povećanje broja stanica je naporno: Znanstvenici moraju izmjeriti stanice iz epruvete iznova i iznova i distribuirati ih u nekoliko novih spremnika kako bi stanicama dobili novi prostor za rast. Kao što se ispostavilo, HeLa stanice su vrlo nepretenciozne: nisu trebale staklenu površinu da bi rasle, mogle bi rasti plivajući u kulturi koja je neprestano miješana "čarobnim uređajem" - važnom tehnologijom koju je Guy razvio, a danas je nazivamo uzgojem suspenzije. To je značilo da HeLa stanice nisu ograničene prostorom kao i sve druge; mogli su dijeliti sve dok je ostao medij kulture. Što je veći spremnik s medijem za kulturu,što je više stanica raslo. Ovo otkriće značilo je da će, ako su HeLa stanice osjetljive na virus polio (jer su neke stanice na njega neosjetljive), riješiti problem masovne proizvodnje stanica i pomoći u izbjegavanju testiranja cjepiva na milijunima majmunskih stanica.
Tako su u travnju 1952., Guy i njegov kolega iz Savjetodavnog odbora za NFIP, William Scherer - mladi istraživač sa Sveučilišta u Minnesoti koji je nedavno branio tezu - pokušao zaraziti Henriettine stanice polio virusom. Nekoliko dana kasnije otkrili su da je HeLa zapravo osjetljivija na virus nego bilo koja druga kultura do sada. I shvatili su da su pronašli upravo ono što NFIP treba.
Također su shvatili da prije nego što mogu započeti masovnu proizvodnju bilo koje stanice, trebaju pronaći novi način da ih transportiraju. Zbrinjavanje aviona koji je Guy koristio bilo je izvrsno za slanje više bočica kolegama, ali previše skupo za velike količine. Milijarde uzgojenih ćelija biti će beskorisno ako se te stanice ne mogu isporučiti na pravo mjesto. I znanstvenici su počeli eksperimentirati.
Godine 1952., na Dan sjećanja, Guy je uzeo nekoliko epruveta HeLa i dovoljno kulture za održavanje nekoliko dana da stanice stanuju, i stavio ih u limenu posudu obloženu plutom i napunjenu ledom da se izbjegne pregrijavanje. Pruživši sve to detaljnim uputama za njegu, poslao je Mary u poštu da pošalje pošiljku s epruvetama Schereru u Minnesoti. Zbog praznika su zatvorene sve pošte u Baltimoru, osim središnjeg ureda u središtu grada. Da bi stigla tamo, Mary je morala promijeniti nekoliko tramvaja, ali na kraju je tamo stigla. Tako je bilo i s kavezima: četiri dana kasnije paket je stigao u Minneapolis. Scherer je stanice stavio u inkubator i počeo rasti. Prvi put su žive stanice uspješno odgodile otpremu.
U slijedećim mjesecima, kako bi se uvjerili da ćelije moći izdržati dug put u bilo kojoj klimi, Guy i Scherer poslali su HeLa cijevi avionom, vlakom i kamionom po cijeloj zemlji, od Minneapolisa do Norwicha, New Yorka i natrag. Stanice su umrle u samo jednoj epruveti.
Kad je NFIP saznao da je HeLa podložna virusu poliomije i može se uzgajati u velikim količinama uz nisku cijenu, odmah je sklopljen sporazum s Williamom Schererom da nadgleda razvoj distribucijskog centra HeLa na Sveučilištu Tuskegee, jednom od najprestižnijih sveučilišta u zemlji za crno. NFIP je za ovaj projekt odabrao Sveučilište Tuskegee zbog Charlesa Bynuma, direktora Crnogorskih aktivnosti zaklade. Bainum - nastavnik znanosti i aktivist za građanska prava i prvi nacionalni direktor crnogorskog zaklada - želio je ugostiti centar u Tuskegeeju za stotine tisuća dolara financiranja, mnogo radnih mjesta i mogućnosti obuke mladih crnih znanstvenika.
U roku od nekoliko mjeseci, tim od šest crnačkih znanstvenika i laboratorijskih tehničara izgradio je tvornicu u Tuskegeeju koja nikada prije nije viđena: industrijski čelični autoklavi za parnu sterilizaciju obložili su zidove, ogromni kanti mehanički miješanih kultura od medija stajali su u redovima, inkubatori puni staklenih boca za stanične kulture i automatski stanični dozirnici su visoki, s dugim, tankim metalnim ručkama koje ubrizgavaju HeLa stanice u jednu cijev za drugom. Svaki tjedan tim u Tuskegeeu pripremao je tisuće litara Guyjevog medijuma za pripremu recepata, miješajući soli, minerale i krvni serum iz raznih učenika, vojnika i farmera pamuka koji su odgovarali na reklame u lokalnim novinama o doniranju krvi za novac.
Nekoliko tehničara poslužilo je kao cjevovod za kontrolu kvalitete i mikroskopiralo stotine tisuća HeLa staničnih kultura svaki tjedan kako bi osigurali da su održive i zdrave. Ostali su poslali stanice istraživačima širom zemlje po strogom rasporedu u 23 centra za ispitivanje protiv cjepiva protiv polio.
Na kraju je Tuskegee tim narastao do 35 znanstvenika i laboratorijskih tehničara koji su proizvodili 20.000 HeLa epruveta tjedno - oko 6 bilijuna stanica. Bila je to prva tvornica ćelija, a započela je s jednom cijevi HeLa koju je Guy poslao Schereru u svom prvom paketu za testiranje, nedugo nakon Henriettine smrti.
Koristeći ove stanice, znanstvenici su uspjeli dokazati učinkovitost Salk cjepiva. Ubrzo je New York Times objavio fotografije crnih žena savijenih nad mikroskopima, pregledavajući stanice i držeći HeLa cijevi u svojim crnim rukama. Naslov je glasio:
Crni znanstvenici i laboratorijski tehničari, od kojih su mnoge bile žene, koristile su stanice crne žene kako bi spasile živote milijuna Amerikanaca - od kojih je većina bila bijela. To se događalo na istom sveučilištu i u isto vrijeme kada su vladini službenici provodili zloglasnu studiju sifilisa.
U početku je Tuskegee centar isporučio HeLa stanice samo laboratorijama koji su testirali polio cjepiva. Međutim, kada je postalo jasno da će biti dovoljno HeLa ćelija za sve, počeli su ih slati svim znanstvenicima koji su ih bili spremni kupiti za deset dolara plus trošak zračne pošte. Ako su znanstvenici željeli otkriti kako će se stanice ponašati u određenom okruženju, kako će reagirati na određenu kemikaliju ili kako grade određeni protein, okrenuli su se HeLa stanicama. Iako su bile kancerogene, imale su sva osnovna svojstva normalnih stanica: gradile su proteine i međusobno komunicirale poput normalnih stanica, dijelile i proizvodile energiju, vadile i regulirale genetski materijal i bile su podložne infekcijama, što ih je činilo optimalnim alatom. sintetizirati i proučavati svešto je moguće - uključujući bakterije, hormone, bjelančevine i posebno viruse.
Virusi se umnožavaju ubrizgavanjem čestica svog genetskog materijala u živu stanicu. Stanica radikalno mijenja svoj program i počinje reproducirati virus umjesto sebe. Kad je riječ o rastućim virusima, kao i u mnogim drugim slučajevima, zloćudna priroda HeLa učinila ih je samo korisnijima. HeLa stanice rasle su mnogo brže od normalnih stanica i stoga su brže donijele rezultate. HeLa stanice bile su radna konja - izdržljiva, jeftina i sveprisutna.
Vrijeme je bilo ispravno. Početkom 1950-ih znanstvenici su tek počeli shvaćati prirodu virusa, a kad su se Henrietta-ove stanice pojavile u laboratorijima širom zemlje, istraživači su ih počeli zaražavati svim vrstama virusa - herpesom, ospicama, zaušnjacima, kozicom, encefalitisom kopitara - kako bi istražili kako virus prodire u stanice, množi se u njima i širi se.
Henriettane ćelije pomogle su postaviti temelje virologije, ali to je bio tek početak. U prvim godinama nakon Henriettove smrti, primivši prve epruvete sa svojim stanicama, istraživači širom svijeta uspjeli su napraviti nekoliko važnih znanstvenih otkrića. Prvo, tim znanstvenika koristio je HeLa da razviju metode za zamrzavanje stanica bez oštećenja ili promjene. Kroz ove metode, stanice su se počele isporučivati širom svijeta na provjereni i standardizirani način koji se koristio za prijevoz smrznute hrane i smrznute sjeme za stočarstvo. To je također značilo da bi znanstvenici mogli držati stanice između eksperimenata, ne brinući o prehrani i sterilnosti. Međutim, većina znanstvenika bila je zadovoljna činjenicom da je zamrzavanjem bilo moguće "popraviti" stanice u njihovim najrazličitijim stanjima.
Stanica je bila smrznuta poput pritiska na tipku za zaustavljanje: podjela, metabolizam i svi ostali procesi zaustavili su se i nastavili nakon odmrzavanja, kao da ste jednostavno pritisnuli gumb za pokretanje. Znanstvenici su sada mogli zaustaviti razvoj stanica bilo kojom frekvencijom tijekom eksperimenta kako bi usporedili odgovor pojedinih stanica na lijek nakon jednog, dva ili šest tjedana. Mogli su promatrati stanje istih stanica u različitim fazama razvoja: znanstvenici su se nadali da će točno vidjeti u kojem trenutku normalna stanica koja raste u kulturi postaje zloćudna - fenomen nazvan spontana transformacija.
Zamrzavanje je prvo na popisu nevjerojatnih poboljšanja kulture tkiva zahvaljujući HeLa. Drugi napredak je standardizacija procesa stanične kulture, područje koje je do tada bilo nered. Guy i njegovi kolege žalili su se da su proveli previše vremena pripremajući medij za kulturu i održavajući stanice živnima. Ono što ih je najviše zabrinulo, jest to što su svi koristili različite sastojke za oblikovanje medija kulture, različite recepte, različite stanice i različite tehnike, a malo tko je znao za metode svojih kolega bilo je teško ili gotovo nemoguće ponoviti nečiji eksperiment. A ponavljanje je nužan dio znanosti: otkriće se ne smatra valjanim ako ga drugi ne mogu ponoviti i dobiti iste rezultate. Guy i drugi su se plašili da bez standardizacije metoda i materijala kultura tkiva može stagnirati.
Znanstvenici su dugo vremena vjerovali da ljudske stanice sadrže četrdeset i osam kromosoma - niti DNK unutar stanica koje sadrže sve naše genetske informacije. Međutim, kromosomi su se slijepili i nije ih bilo moguće točno prebrojati. Te 1955. godine teksaški genetičar pogrešno je pomiješao pogrešnu tekućinu s HeLa i nekim drugim stanicama. Ova nesreća je imala sreće. Hromosomi u stanicama su nabrekli i odvojeni jedan od drugog, a znanstvenici su prvi put mogli detaljno ispitati svaki od njih. Ovo slučajno otkriće bilo je prvo u nizu otkrića koja su omogućila dva istraživača iz Španjolske i Švedske da otkriju da normalna ljudska stanica sadrži četrdeset i šest kromosoma.
Znajući koliko kromosoma osoba treba imati, znanstvenici bi mogli reći da ih netko ima više ili manje i uz pomoć tih podataka dijagnosticirati genetske bolesti. Ubrzo su istraživači širom svijeta počeli prepoznavati kromosomske abnormalnosti. Dakle, ustanovljeno je da su pacijenti s Downovim sindromom imali dodatni kromosom u dvadeset prvom paru, oni koji pate od Klinefelterovog sindroma imali su dodatni spolni kromosom, a u bolesnika sa sindromom Shereshevsky-Turner, ovaj kromosom nije bio prisutan ili je bio u kvaru.
Sa svim tim novim razvojem, potražnja za HeLa stanicama se povećavala i Tuskegee centar više nije bio u mogućnosti ispuniti to. Vlasnik tvrtke Microbiological Associates - vojni čovjek po imenu Samuel Reeder - nije znao, ali njegov poslovni partner Monroe Vincent bio je sam istraživač i shvatio je koliko je potencijalno veliko tržište stanica. Stanice su bile potrebne mnogim znanstvenicima, a malo ih je imalo vremena ili mogućnosti da ih uzgaja u dovoljnim količinama. Istraživači su samo željeli kupiti stanice, pa su Reeder i Vincent odlučili koristiti HeLa kao odskočnu dasku za pokretanje prvog industrijskog centra za opskrbu ćelija.
Sve je počelo tvornicom ćelija - kako ju je Reeder nazvao. U Bethesdi u Marylandu, usred prostranog skladišta koje je nekada bila tvornica za proizvodnju Fritos čipsa, podigao je stakleni kućište i ugradio pokretnu transportnu traku sa stotinama ugrađenih nosača epruveta. Izvan staklene sobe sve je bilo organizirano gotovo kao u Tuskegeeu - ogromni spremnici za kulturu, samo još veći. Kad su kavezi bili spremni za otpremu, zazvonilo je glasno zvono i svi tvornički radnici, uključujući zaposlenike odjela za poštarinu, prekinuli su trenutni posao, pravilno se oprali u sobi za sterilizaciju, obukli ogrtač i kapu i postrojili se na pokretnu traku. Neki su ispunili epruvete, drugi su ih zatvorili gumenim čepovima, zapečatili ih ili stavili u prijenosni inkubator,gdje su bili pohranjeni do pakiranja za otpremu.
Laboratoriji poput Nacionalnog instituta za zdravstvo bili su najveći kupci mikrobioloških suradnika i kontinuirano su naručivali milijune HeLa ćelija po zadanom rasporedu. Međutim, znanstvenici s bilo kojeg mjesta na svijetu mogli su naručiti, platiti manje od pedeset dolara, a mikrobiološki suradnici odmah su im poslali epruvete HeLa stanica. Reeder je potpisao ugovor s nekoliko glavnih zrakoplovnih tvrtki, pa je, kamo god je stigla narudžba, kurir poslao ćelije sljedećim letom, pokupljeni su u zračnu luku i taksijem su ih poslali u laboratorije. Tako je nastala višemilijunska industrija ljudskih biomaterijala korak po korak.
Henriettine stanice nisu mogle vratiti mladolikost na vratima žena, ali kozmetičke i farmaceutske tvrtke u Europi i Sjedinjenim Državama počele su ih koristiti umjesto laboratorijskih životinja za testiranje novih proizvoda i lijekova koji su prouzrokovali uništavanje ili oštećenje stanica. Znanstvenici su presijekli HeLa stanice na pola, a dokazali su da stanice mogu živjeti nakon uklanjanja jezgre, a koristili su ih za razvoj metoda ubrizgavanja tvari u stanicu bez ubijanja. HeLa je korišten za razumijevanje učinaka steroida, kemoterapije lijekovima, hormona, vitamina i stresa u okolišu; zaraženi su tuberkulozom, salmonelom i bakterijama koje uzrokuju vaginitis.
Godine 1953., na zahtjev američke vlade, Guy je odnio Henriettine ćelije sa sobom na Daleki istok kako bi proučio hemoragičnu groznicu koja je ubijala američke vojnike. Ubrizgavao je HeLa štakorima i vidio imaju li rak. No većim dijelom pokušavao je preći iz HeLa u rastuće normalne stanice i stanice raka kod jednog pacijenta kako bi ih mogao usporediti jedni s drugima. Nije mogao izbjeći naizgled beskrajna pitanja o HeLi i staničnoj kulturi drugih znanstvenika. Znanstvenici su svaki tjedan više puta posjećivali njegov laboratorij sa zahtjevima da ih nauče tehnici, a on je često morao putovati svijetom pomažući uspostaviti rad na razmnožavanju stanica.
Mnogi od Guyjevih kolega inzistirali su na tome da objavi podatke o istraživanju i primi priznanje koje zaslužuje, ali uvijek je upozoravao da ne budu zaposleni. Cijelu noć je radio kod kuće. Kasnio je s rokom za pripremu dokumenata za potporu, često se odgađao mjesecima s odgovorima na pisma i jednom je plaćao plaću preminulog zaposlenika tri mjeseca prije nego što ga je netko primijetio. Mary i Margaret gunđale su godinu dana da bi George objavio sve o uzgoju HeLa; na kraju je napisao kratak odlomak za konferenciju. Nakon toga, Margaret je sama pisala o njegovom radu umjesto njega i bjesnila o objavljivanju.
Sredinom 1950-ih mnogi su znanstvenici već radili s staničnim kulturama, a Guy je bio umoran. Pisao je prijateljima i kolegama: "Netko mora smisliti kako nazvati ono što se sada događa, recimo:" Svijet je poludio s rastom ovog tkiva i njegovim mogućnostima. " Nadam se da barem neki ovaj razgovor o uzgoju tkiva ima temelje i koristi ljudima … a najviše od svega želim da se ovaj hype malo uguši …"
Momka je nervirala preljuba oko HeLa. Uostalom, bilo je i drugih ćelija, uključujući i one koje je sam uzgajao: A. Fi. i D-1 Re, imenovan za pacijente od kojih je uzet izvorni uzorak. Guy ih je cijelo vrijeme nudio znanstvenicima, ali te je stanice bilo teže uzgajati i zato nikad nisu uživale u popularnosti Henrietta-ovih stanica. Momak više nije distribuirao HeLa jer su kompanije preuzele zadatak, no nije mu se svidjela činjenica da je uzgoj HeLa potpuno izvan njegove kontrole.
Otkako je pogon za proizvodnju Tuskegee počeo s radom, Guy je poslao pisma znanstvenicima u pokušaju da ograniči upotrebu HeLa stanica. Jednom se u pismu svom starom prijatelju Charlesu Pomeratu požalio da su svi okolo, uključujući osoblje Pomeratove laboratorije, koristili HeLa za istraživanje, za što je Guy bio "sposobniji", a neki su to već učinili, ali još nisu objavili rezultate … Pomerat je u odgovoru napisao:
Što se tiče vašeg … neodobravanja široko rasprostranjenog istraživanja soja HeLa, ne vidim kako se možete nadati da će usporiti stvari, jer ste i sami toliko proširili taj pritisak da ga je danas moguće kupiti za novac. To je gotovo isto što i zamoliti ljude da ne eksperimentiraju na zlatnim hrčcima!.. Razumijem da su HeLa stanice postale dostupne javnosti samo zahvaljujući vašoj ljubaznosti. Pa zašto, zapravo, sada mislite da svi žele zgrabiti komad za sebe?
Pomerat je vjerovao da je Guy trebao dovršiti vlastita istraživanja o HeLi prije nego što je "HeLa] pustio u javnost, jer nakon toga kultura postaje univerzalno znanstveno vlasništvo."
Međutim, Guy nije. Čim su HeLa stanice postale „univerzalno znanstveno svojstvo“, ljudi su se počeli pitati tko je njihov donator.